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本文标题:光镜显微镜下观测过氧化物酶的化学反应步骤

信息分类:信息交流 新闻来源:未知 发布时间:2016-1-30 16:33:39
光镜显微镜下观测过氧化物酶的化学反应步骤

     操作步骤
    (1)用3%戊二醛固定液固定不同时间的各类切片,用配固
定液的缓冲液漂洗。充分漂洗可使线粒体的内源性细胞色素C流
失,抑制夹杂反应。
    (2)在孵育液中37°C壁光反应20-60min.
    (3)用0.05mol压缓冲液(含6.5%蔗糖)漂洗。
    (4)光镜直接观察。电镜用1.5%亚铁氰化钾一1%锇酸后固定,
常规电镜包埋、切片、观察。
    对照
    (1)固定方法不同可显示不同的过氧化物酶,固定时间长,
抑制过氧化氢酶,显示髓过氧化物酶等酶的活性。
    (2)孵育液中加50mmol/L氰化钾抑制中性粒细胞的过氧化
物酶,选择性显示嗜酸粒白细胞的髓过氧化物酶。
    (3)热抑制大部分过氧化物酶。

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